Άγαρ Salmonella-Shigella ίδρυμα, προετοιμασία και χρήσεις

Το Salmonella-Shigella agar επίσης είναι γνωστό ως SS άγαρ είναι ένας μετρίως επιλεκτικό και διαφορικό μέσο, ​​ειδικά σχεδιασμένο για την απομόνωση των εντεροπαθογόνων βακτήρια του γένους Salmonella και Shigella, τόσο από περιβαλλοντικά δείγματα και κλινικές.

SS άγαρ έχει μια πολύπλοκη σύνθεση? Αποτελείται από εκχύλισμα κρέατος, πεπτόνη, λακτόζη, χολικά άλατα, κιτρικό νάτριο, θειοθειικό νάτριο, κιτρικό σίδηρο, άγαρ, ουδέτερο ερυθρό, λαμπρό πράσινο και απεσταγμένο ύδωρ. Δεδομένης της υψηλής εκλεκτικότητας του μπορεί να σπαρθεί με άφθονη δείγματα αναμειγνύονται χλωρίδας.

Σε μικροβιολογικά εργαστήρια μέσο Salmonella Shigella χρησιμοποιείται για να διερευνηθεί η παρουσία των Salmonella και Shigella σε δείγματα κοπράνων διαρροϊκές, λυμάτων, πόσιμου νερού και τροφίμων.

Μερικές φορές είναι απαραίτητο να χρησιμοποιηθούν ζωμοί προ-εμπλουτισμού (ζωμός λακτόζης) και εμπλουτισμός (ζωμός κυστίνης σεληνίτη) για την ανάκτηση στελεχών σαλμονέλας.

Αυτά τα στάδια απαιτούνται όταν υπάρχει υποψία ύπαρξης σαλμονέλας σε πολύ χαμηλή ποσότητα ή όπου η στέλεχος μπορεί να υποστεί κακομεταχείριση με μεθόδους χαρακτηριστικές της βιομηχανικής παραγωγής, κυρίως μεταποιημένων τροφίμων. Συνιστάται επίσης ο εμπλουτισμός των δειγμάτων κοπράνων από ασθενείς που έχουν υποβληθεί σε θεραπεία με αντιβιοτικά.

Στη συνέχεια, ο ζωμός εμπλουτισμού μπορεί να σπαρθεί σε άγαρ Salmonella Shigella και άλλα παρόμοια μέσα, όπως άγαρ ξυλόζη, λυσίνη δεοξυχολικό (XLD) άγαρ και Hektoen εντερική (HE).

Ευρετήριο

• 1 Ίδρυμα
  • 1.1 Διατροφική ισχύς
  • 1.2 Συνέπεια
  • 1.3 Επιλεκτική
  • 1.4 Διαφορικό
• 2 Προετοιμασία
• 3 Χρήση
• 4 Περιορισμοί
• 5 Έλεγχος ποιότητας
• 6 Αναφορές

Ίδρυμα

Κάθε συστατικό του μέσου καλλιέργειας Salmonella-Shigella έχει μια συγκεκριμένη λειτουργία και το μίγμα ως σύνολο του δίνει τις ιδιότητες που το χαρακτηρίζουν.

Θρεπτική δύναμη

εκχύλισμα κρέατος και πεπτόνη (καζεΐνη αφομοιώσουν και ζωικών ιστών) παρέχουν τα απαιτούμενα θρεπτικά συστατικά (άζωτο, άνθρακα και βιταμίνες) για την ανάπτυξη των μικροοργανισμών ικανών να ανέχεται τα άλλα συστατικά.

Συνέπεια

Το άγαρ-άγαρ είναι υπεύθυνο για την παροχή στερεής συνεκτικότητας στο μέσο.

Επιλεκτική

Αυτό το μέσο είναι εξαιρετικά επιλεκτικό επειδή περιέχει χολικά άλατα, κιτρικό νάτριο και λαμπερό πράσινο. Επομένως, αναστέλλει την ανάπτυξη όλων των θετικών κατά Gram βακτηρίων και των περισσότερων Gram-αρνητικών βακίλλων, συμπεριλαμβανομένων μερικών κολοβακτηριδίων.

Ενώ τα βακτηρίδια του γένους Salmonella και ορισμένα στελέχη του Shigella υποστηρίζουν αυτές τις ενώσεις.

Κυρίως, το γένος Salmonella είναι πολύ ανθεκτικό στα χολικά άλατα, τόσο πολύ ώστε να μπορούν να ζουν στη χοληδόχο κύστη ορισμένων ασθενών-φορέων που εκδιώζουν συνεχώς τα βακτηρίδια μέσω των περιττωμάτων.

Διαφορικό

Η λακτόζη είναι ο ζυμώμενος υδατάνθρακας που βοηθά στη διαφοροποίηση των στελεχών που ζυμώνονται με τη λακτόζη από τα μη ζυμωτικά στελέχη. Αυτή η ιδιότητα αποδεικνύεται από την παρουσία του δείκτη ρΗ, ο οποίος σε αυτό το μέσο είναι κόκκινο φαινόλης.

Τα στελέχη ζυμώσεως λακτόζης δίδουν ερυθρές αποικίες, ενώ τα μη ζυμωτικά στελέχη είναι άχρωμα. Αυτό το χαρακτηριστικό είναι σημαντικό, δεδομένου ότι η Salmonella και η Shigella δεν ζυμώνουν τη λακτόζη.

Από την άλλη πλευρά, το μέσο αυτό περιέχει θειοθειικό νάτριο ως πηγή θείου και κιτρικού σιδήρου ως πηγή σιδήρου. Και οι δύο ενώσεις είναι σε θέση να διαφοροποιήσουν τα βακτήρια ικανά να παράγουν υδρόθειο. Αυτά αντιδρούν ώστε να σχηματίσουν ένα μαύρο ίζημα αδιάλυτου και ορατού σουλφιδίου σιδήρου.

Αυτή η ιδιότητα έχει κάποια στελέχη του γένους Salmonella. Κανονικά οι αποικίες τους είναι άχρωμες επίπεδες με μια μαύρη κουκίδα στο κέντρο της. Οι υπόλοιπες σαλμονέλλες δεν παράγουν Η₂S και αναπτύσσονται ως άχρωμες αποικίες.

Από την άλλη πλευρά, οι αποικίες του γένους Shigella είναι άχρωμες επίπεδες χωρίς μαυρίσματος.

Προετοιμασία

Αυτό σημαίνει ότι είναι πολύ εύκολο να προετοιμαστείς.

Ζυγίζονται 63 γρ. Του αφυδατωμένου εμπορικού μέσου και διαλύονται σε ένα λίτρο απεσταγμένου νερού. Ζεσταίνουμε το διάλυμα και ανακατεύουμε. Το μείγμα μπορεί να φτάσει σε βρασμό για έως και μερικά λεπτά.

Αυτό το μέσο δεν πρέπει να αποστειρώνεται σε αυτόκαυστο. Μετά τη διάλυσή του, σερβίρεται απευθείας σε απλά ή διπλά αποστειρωμένα τρυβλία.

Όταν στερεοποιούνται, είναι διατεταγμένα ανεστραμμένα στους κατασκευαστές πλακών και αποθηκεύονται σε ψυγείο (2-8 ° C) μέχρι να χρησιμοποιηθούν.

Το μέσο μετά την παρασκευή θα πρέπει να είναι ρΗ 7,2 ± 0,2 και κόκκινο πορτοκαλί.

Είναι σημαντικό να επιτρέπεται η συγκόλληση των δίσκων πριν από τη σπορά των δειγμάτων. Μπορείτε να σπέρνετε απευθείας το αρχικό δείγμα, να εκφορτώσετε υλικό σε ένα μέρος του άγαρ και στη συνέχεια να κλαδεύετε από την εξάντληση.

Σε περίπτωση χρήσης εμπλουτισμένου ζωμού, περάστε ένα μέρος του ζωμού σεληνίτη και στειρώστε με σπάτουλα drigalski.

Επωάστε στους 37 ° C για 24 ώρες σε αερόβιο.

Λάβετε υπόψη ότι η ποσότητα γραμμαρίων που ζυγίζεται και το τελικό pH του μέσου μπορεί να ποικίλει από το ένα εμπορικό σπίτι στο άλλο. Η πλάκα βάσης του μέσου φέρνει πάντοτε τις ενδείξεις για την παρασκευή του.

Χρήση

Χρησιμοποιείται συχνά στην ανάλυση καλλιεργειών σκαμνίων και στη μικροβιολογική μελέτη δειγμάτων υπολειμμάτων ύδατος, πόσιμου νερού και τροφής.

Συχνά παρασκευάζονται διπλές πλάκες, από την μία πλευρά τοποθετείται άγαρ Salmonella-Shigella και από την άλλη πλευρά άγαρ XLD.

Περιορισμοί

-Ορισμένα στελέχη του Shigella δεν αναπτύσσονται σε αυτό το μέσο. Ως εκ τούτου, δεν συνιστάται για πρωταρχική απομόνωση αυτού του γένους.

-Δεν είναι κάθε σαφής αποικία με μαύρο κέντρο ενδεικτική της σαλμονέλας. πρέπει να πραγματοποιηθούν βιοχημικές δοκιμές για να γίνει σωστή ταυτοποίηση, δεδομένου ότι οι αποικίες ορισμένων στελεχών του Proteus δεν μπορούν να διακριθούν από εκείνες της Salmonella.

-Το αφυδατωμένο μέσο πρέπει να είναι προσεκτικό από την έκθεση στο περιβάλλον, καθώς είναι πολύ υγροσκοπικό. Επομένως, πρέπει να διατηρείται σε ένα στεγνό και καλά κλειστό περιβάλλον. Ανοίξτε για πολύ σύντομες περιόδους.

-Με την πάροδο του χρόνου τα χολικά άλατα στο μέσο μπορούν να καταβυθιστούν, σχηματίζοντας μια εικόνα παρόμοια με μια ματ με άγαρ, αλλά αυτό δεν επηρεάζει τα αποτελέσματα.

-Μερικά στελέχη του Shigella μπορούν να ζυμώσουν αργά τη λακτόζη.

Έλεγχος ποιότητας

Για να αποδείξετε ότι το μέσο λειτουργεί σωστά, συνιστάται να φυτέψετε γνωστά ή πιστοποιημένα στελέχη ελέγχου και να παρατηρήσετε εάν η ανάπτυξη ικανοποιεί τα αναμενόμενα χαρακτηριστικά.

Για το σκοπό αυτό, τα στελέχη του Ε. Coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium o Enterococcus faecalis.

Τα αναμενόμενα αποτελέσματα είναι:

Escherichia coli --ροζ κυρτές αποικίες.

Enterobacter και Klebsiella- μεγάλες αποικίες και κόκκινο ή ροζ βλεννοειδές.

Shigella flexneri --διαυγείς ή άχρωμες επίπεδες αποικίες.

Salmonella typhimurium - άχρωμες αποικίες με μαύρο κέντρο.

Enterococcus faecalis-- ολική αναστολή.

Αναφορές

1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Salmonella-Shigella agar. 2009. Διαθέσιμο στη διεύθυνση: f-soria.es
2. BD Laboratory. BD Salmonella-Shigella Agar. 2013. Διατίθεται στη διεύθυνση: bd.com
3. Εργαστήρια Βρετανίας. Salmonella-Shigella Agar. 2015. Διατίθεται στη διεύθυνση: britanialab.com
4. Διαγνωστικά Valtek. Άγαρ Salmonella-Shigella (SS Agar) .2010. Διατίθεται στη διεύθυνση: andinamedica.com
5. Forbes Β, Sahm D, Weissfeld Α. (2009). Μικροβιολογική διάγνωση της Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana S.A. Αργεντινή.
6. Koneman Ε, Allen S, Janda W, Schreckenberger Ρ, Winn W. (2004). Μικροβιολογική διάγνωση. 5η έκδοση. Editorial Panamericana S.A. Αργεντινή.