MacConkey Agar foundation, προετοιμασία και χρήσεις

Το Άγαρ MacConkey Είναι ένα στερεό μέσο καλλιέργειας που επιτρέπει την αποκλειστική απομόνωση των αρνητικών κατά Gram βακίλλων. Για το λόγο αυτό είναι ένα επιλεκτικό μέσο και επιτρέπει επίσης τη διάκριση μεταξύ βακίλων ζύμωσης και μη ζύμωσης λακτόζης, γεγονός που το καθιστά διαφορικό μέσο. Είναι ένα από τα πλέον χρησιμοποιούμενα μέσα καλλιέργειας σε εργαστήριο μικροβιολογίας.

Αυτό το μέσο χρησιμοποιείται κυρίως για την απομόνωση των Gram αρνητικών βακίλλων που ανήκουν στην οικογένεια Enterobacteriaceae, συμπεριλαμβανομένων ευκαιριακών και εντεροπαθογόνων ειδών.

Μπορεί επίσης να χρησιμοποιηθεί για την απομόνωση άλλων εντερικών βακίλων που κατοικούν στο γαστρεντερικό σωλήνα, αλλά δεν ανήκουν σε Enterobacteriaceae, ως Aeromonas sp, Plesiomonas sp, μεταξύ άλλων.

Τέλος, μπορεί να απομονωθούν άλλα μη ζύμωση Gram αρνητικά ραβδία γλυκόζης που βρέθηκαν στην ατμόσφαιρα, το έδαφος ή το νερό, αλλά μερικές φορές μπορεί να είναι ευκαιριακά παθογόνα όπως Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, αλκαλικό sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, μεταξύ άλλων.

Ευρετήριο

• 1 Ίδρυμα
  • 1.1 Άγαρ MacConkey
• 2 Προετοιμασία
• 3 Χρήσεις συμβατικού άγαρ MacConkey
• 4 Άλλες παραλλαγές του MacConkey άγαρ
  • 4.1 άγαρ MacConkey με σορβιτόλη
  • 4.2 Άγαρ MacConkey χωρίς κρυσταλλικό ιώδες ή αλάτι
  • 4.3 Άγαρ MacConkey με κεφοπεραζόνη
  • 4.4 Άγαρ MacConkey παρασκευασμένο με 10% θαλασσινό νερό ο / ο
• 5 Αναφορές

Ίδρυμα

Macrokey Agar

Η ίδρυση αυτού του μέσου μπορεί να εξηγηθεί μέσω της περιγραφής των συστατικών του, επειδή ο καθένας έχει έναν σκοπό που καθορίζει μια ιδιότητα του.

Χολικά άλατα και ιώδες κρύσταλλο

Υπό αυτή την έννοια, το άγαρ MacConkey έχει σύνθετη σύνθεση. Πρώτα απ 'όλα περιέχει χολικά άλατα και ιώδες κρύσταλλο.

Αυτά τα στοιχεία είναι υπεύθυνα για την αναστολή της ανάπτυξης των θετικών κατά Gram βακτηρίων και ορισμένων απαιτητικών Gram-αρνητικών βακίλλων. Με τη σειρά του ευνοεί την ανάπτυξη αρνητικών κατά Gram βακίλλων που δεν επηρεάζονται από αυτές τις ουσίες. Γι 'αυτό είναι ένα επιλεκτικό μέσο.

Λέγεται ότι είναι ελαφρώς εκλεκτική σε σύγκριση με άλλα μέσα που αναστέλλουν επίσης την ανάπτυξη θετικών κατά Gram βακτηρίων και επίσης των περισσότερων Gram-αρνητικών βακτηριδίων.

Είναι εξαιρετικά επιλεκτικό για ένα συγκεκριμένο γένος, όπως το άγαρ TCBS για απομόνωση του Vibrio cholerae και άλλα παρόμοια αλοφιλικά και αλκαλόφιλα είδη.

Πεπτόνες, πολυπεπτόνες και λακτόζη

Περιέχει ουσίες που παρέχουν τα απαραίτητα θρεπτικά συστατικά στους μικροοργανισμούς που αναπτύσσονται σε αυτό το μέσο, ​​όπως πεπτόνες, πολυπεπτόνες και λακτόζη.

Η λακτόζη είναι το βασικό σημείο για το μέσο ως διαφορικό μέσο, ​​επειδή οι μικροοργανισμοί που έχουν την ικανότητα να ζυμώνουν τη λακτόζη θα αναπτύξουν ισχυρές ροζ αποικίες.

Ορισμένα βακτήρια μπορούν να ζυμώσουν τη λακτόζη αργά ή ασθενώς, αναπτύσσοντας απαλούς ροζ αποικίες και παραμένουν θετική λακτόζη.

Εκείνοι που δεν ζυμώσουν τη λακτόζη χρησιμοποιούν τις πεπτόνες ως πηγή ενέργειας, παράγοντας αμμωνία αλκαλίζοντας το μέσο. Επομένως, οι αποικίες που προέρχονται είναι άχρωμες ή διαφανείς.

PH δείκτη

Η αλλαγή χρώματος επιτυγχάνεται μέσω μιας άλλης βασικής ένωσης που έχει άγαρ MacConkey. Αυτή η ένωση είναι ο δείκτης pH, ο οποίος σε αυτή την περίπτωση είναι ουδέτερος κόκκινος.

Η ζύμωση της λακτόζης παράγει την παραγωγή μικτών οξέων. Αυξάνουν το μέσο σε ρΗ κάτω από 6,8..

Αυτό αναγκάζει τον δείκτη pH να γυρίσει προς έντονη ροζ απόχρωση. Η ένταση του χρώματος μπορεί να ποικίλει ανάλογα με το τελικό ρΗ.

Αποσταγμένο νερό, χλωριούχο νάτριο και άγαρ

Από την άλλη πλευρά, περιέχει απεσταγμένο νερό και χλωριούχο νάτριο που δίνουν την ενυδάτωση και την οσμωτική ισορροπία στο μέσο. Τέλος, το μέσο περιέχει άγαρ, το οποίο είναι η βάση που παρέχει τη σύσταση στερεού μέσου.

Το παρασκευασμένο μέσο άγαρ MacConkey πρέπει να έχει τελικό ρΗ ρυθμισμένο στα 7,1 ± 0,2..

Προετοιμασία

Για ένα λίτρο άγαρ MacConkey, 50 g του αφυδατωμένου μέσου πρέπει να ζυγίζονται, στη συνέχεια τοποθετούνται σε φιάλη και διαλύονται σε ένα λίτρο απεσταγμένου νερού. Μετά από 10 λεπτά ανάπαυσης θερμαίνεται αναμειγνύοντας συνεχώς έως ότου βράσει για 1 λεπτό.

Στη συνέχεια τοποθετήστε τη φιάλη στο αυτόκλειστο και αποστειρώστε στους 121 ° C για 20 λεπτά. Στο τέλος του χρόνου, αφαιρείται από το αυτόκλειστο και αφήνεται να κρυώσει σε θερμοκρασία 45 ° C, στη συνέχεια σερβίρεται σε αποστειρωμένα τρυβλία Petri μέσα σε μια κουκούλα με ελαστική ροή ή μπροστά από τον καυστήρα Bunsen..

Αφήνεται να στερεοποιηθεί και να αποθηκευτεί σε ένα συγκρατητή πλάκας ανεστραμμένο και να ψυχθεί στους 2-8 ° C μέχρι να χρησιμοποιηθεί.

Για να αποκτήσετε ένα άγαρ MacConkey που αναστέλλει το φαινόμενο σβώλου που παράγεται από το γένος Proteus, χρησιμοποιείται άγαρ MacConkey χαμηλού άλατος..

Χρήσεις συμβατικού άγαρ MacConkey

Το άγαρ MacConkey συμπεριλαμβάνεται σε όλα τα μέσα καλλιέργειας που είναι διατεταγμένα για τη σπορά κλινικών δειγμάτων που λαμβάνονται στο εργαστήριο. Είναι επίσης χρήσιμη στη μικροβιολογία τροφίμων και στην περιβαλλοντική μικροβιολογία.

Η ποικιλία των Gram αρνητικών βακίλλων που αναπτύσσονται σε αυτό το μέσο εκφράζει φαινοτυπικά χαρακτηριστικά που βοηθούν στην τεκμαιρόμενη διάγνωση των εν λόγω ειδών. Για παράδειγμα, το μέγεθος, το χρώμα, η συνέπεια και η μυρωδιά των αποικιών είναι μερικά από τα χαρακτηριστικά που μπορούν να καθοδηγήσουν.

Σε αυτό το περιβάλλον, είδη του Escherichia coli, Klebsiella sp και Enterobacter sp παράγουν ισχυρές ροζ αποικίες, που περιβάλλεται από μια περιοχή κατακρημνισμένης χολής.

Σε όσο το δυνατόν περισσότερα βακτήρια Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp και Hafnia sp Μπορούν να εμφανιστούν χωρίς χρώμα μετά από 24 ώρες ή ανοιχτό ροζ σε 24 -48 ώρες.

Ομοίως, τα γένη Proteus, Edwadsiella, Salmonella και Shigella παράγουν άχρωμες ή διαφανείς αποικίες.

Άλλες παραλλαγές του άγαρ MacConkey

Υπάρχουν και άλλες παραλλαγές του agar MacConkey που έχουν συγκεκριμένους σκοπούς. Στη συνέχεια αναφέρονται:

Αγάρ MacConkey με σορβιτόλη

Αυτό το μέσο σχεδιάστηκε για να διακρίνει το εντεροπαθογόνο στέλεχος (Escherichia coli εντεροαιμορραγικό Ο157: Η7) των υπόλοιπων στελεχών του Escherichia coli.

Αυτό το μέσο αλλάζει τη λακτόζη υδατάνθρακα για τη σορβιτόλη. Τα στελέχη του Ε. Coli enterohaemorrhagic O157: H7 διαφέρουν από το υπόλοιπο επειδή δεν ζυμώνουν σορβιτόλη και επομένως λαμβάνονται διαφανείς αποικίες, ωστόσο τα υπόλοιπα στελέχη Ε. Coli εάν ζυμώνουν τη σορβιτόλη και οι αποικίες είναι ισχυρές ροζ.

MacConkey Άγαρ χωρίς κρυσταλλικό ιώδες ή αλάτι

Αυτό το άγαρ διαφέρει πολύ από το κλασικό άγαρ MacConkey, καθώς δεν έχει κρυσταλλικό ιώδες, τα θετικά κατά Gram βακτήρια μπορούν να αναπτυχθούν.

Από την άλλη πλευρά, η απουσία αλάτων αναστέλλει την εμφάνιση σμήγματος πάνω στο άγαρ που παράγεται από μερικά εντερικά βακίλλια, όπως αυτά του γένους Proteus, και έτσι διευκολύνουν την απομόνωση όλων των παρόντων βακτηρίων, συμπεριλαμβανομένων των θετικών κατά Gram βακτηρίων.

Άγαρ MacConkey με κεφαφοπερόνη

Αυτή η παραλλαγή του άγαρ MacConkey σχεδιάστηκε για να απομονώνεται αρχικά Laribacter hongkongensis και αργότερα συνειδητοποίησαν ότι ήταν χρήσιμο για την απομόνωση του Arcobacter butzleri. ΑΚαι οι δύο είναι ελαφρώς καμπυλωμένοι αρνητικοί Gram bacilli ανθεκτικοί στην κεφοπεραζόνη.

Αυτά τα βακτήρια έχουν πρόσφατα συνδεθεί ως αίτια γαστρεντερίτιδας και διάρροιας που αποκτήθηκαν σε ασιατικά και ευρωπαϊκά άτομα, τα οποία εμφανίζονται ως δύο ισχυροί νεοεμφανιζόμενοι παθογόνοι οργανισμοί.

Το αντιβιοτικό επιτρέπει την αναστολή της συνοδευτικής χλωρίδας της γαστρεντερικής οδού, η οποία ευνοεί την ανάπτυξη αυτών των βακτηριδίων, εμποδίζοντας τους να περάσουν απαρατήρητες, δεδομένου ότι χρειάζονται 72 ώρες για να αναπτυχθούν.

Agar MacConkey που παρασκευάστηκε με 10% θαλασσινό νερό ο / ο

Αυτή η παραλλαγή είναι χρήσιμη για την αξιολόγηση της υγείας βακτηριακών δεικτών μόλυνσης από κόπρανα, συμπεριλαμβανομένων των συνολικών κολοβακτηριδίων και κολοβακτηριδίων σε ψυχαγωγικές αλμυρό νερό (παραλίες και κόλποι).

Κορτέζ et al το 2013 έδειξε ότι το τοιουτοτρόπως παρασκευασθέν μέσο αυξάνει σημαντικά την ανάκτηση των μικροοργανισμών αυτών στο αλατούχο περιβάλλον, σε σύγκριση με τη χρήση του MacConkey άγαρ παρασκευάζεται με απεσταγμένο νερό.

Αυτό συμβαίνει επειδή στην τροποποιημένο μέσο η ανάπτυξη των βακτηρίων τα οποία είναι φυσιολογικώς σε μια κατάσταση αδράνειας «βιώσιμα αλλά μη καλλιεργήσιμων» διεγείρονται εκ τούτου δεν αποδίδονται σε συμβατικά.

Αναφορές

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et αϊ. Χρήση του άγαρ του MacConkey cefoperazone για επιλεκτική απομόνωση του Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. "Άγαρ MacConkey". Wikipedia, Η ελεύθερη εγκυκλοπαίδεια. 4 Απρ 2018, 18:16 UTC. 29 Δεκεμβρίου 2018, 15:22 el.wikipedia.org
3. Forbes Β, Sahm D, Weissfeld Α. (2009). Μικροβιολογική διάγνωση της Bailey & Scott. 12 ed. Αργεντινή Πανamericana S.A Σύνταξη.
4. Koneman Ε, Allen S, Janda W, Schreckenberger Ρ, Winn W. (2004). Μικροβιολογική διάγνωση. (5η έκδοση). Αργεντινή, Εκδοτική Panamericana S.A..
5. Cortez J, Ruiz Υ, Medina L, Valbuena Ο. Επίδραση των μέσων καλλιέργειας που παρασκευάζονται με θαλασσινό νερό στους δείκτες υγείας στα θαλάσσια ύδατα των ιαματικών πηγών Chichiriviche, στο κράτος Falcón, στη Βενεζουέλα. Rev Soc Come Microbiol 2013 · 33: 122-128
6. García Ρ, Paredes F, Fernández del Barrio Μ. (1994). Πρακτική κλινική μικροβιολογία. Πανεπιστήμιο του Κάντιθ, 2η έκδοση. Υπηρεσία Εκδόσεων της UCA.