Selenite foundation βάσης, προετοιμασία και χρήσεις

Το σεληνίτη ζωμό Είναι ένα εκλεκτικό υγρό μέσο καλλιέργειας. Σχεδιάστηκε από τη Leifson για τον εμπλουτισμό των δειγμάτων όπου υπάρχει υποψία για την παρουσία εντεροπαθογόνων βακτηρίων του γένους Salmonella..

Αυτό το μέσο πληροί τις απαιτήσεις της Αμερικανικής Ένωσης Δημόσιας Υγείας (ΑΡΗΑ), και ως εκ τούτου είναι αποδεκτή για την διερεύνηση της σαλμονέλας στα δείγματα κοπράνων, ούρων, υγρά ή στερεά τροφή, νερό, κ.λπ..

Η χημική σύνθεση που διαθέτει ευνοεί την ανάκτηση αυτών των μικροοργανισμών και με τη σειρά του αναστέλλει την ανάπτυξη άλλων. Είναι κυρίως τοξικό για τα περισσότερα βακτηρίδια που ανήκουν στην οικογένεια Enterobacteriaceae. Ωστόσο, επίσης επιτρέπει την ανάκτηση των Shigella και δεν αναστέλλουν την ανάπτυξη των Pseudomonas και Proteus.

Αποτελείται από άνυδρο σουλφίδιο του νατρίου, άνυδρο φωσφορικό νάτριο, πεπτόνες και λακτόζη. Υπάρχει επίσης μια παραλλαγή στην οποία προστίθεται η κυστίνη, εξ ου και το όνομα της σεληνίτης-κυστίνης ζωμός.

Επί του παρόντος, η χρήση των Selenite ζωμού κυστίνης προτιμάται, δεδομένου ότι υψηλότερο ποσοστό ανάκτησης ισοδύναμο με αυτό που παρατηρείται με άλλα επιλεκτικά μέσα για τον ίδιο σκοπό Salmonella, όπως ζωμός τετραθειονικό νάτριο λαμβάνεται.

Ευρετήριο

• 1 Ίδρυμα
• 2 Προετοιμασία
  • 2.1 - Selena
  • 2.2 - Παρασκευή του εμπορικού μέσου
  • 2.3 Μέσο σεληνίτης-κυστίνης παραλλαγής
• 3 Χρήσεις
• 4 Τοποθέτηση
• 5 Έλεγχος ποιότητας
• 6 Περιορισμοί
• 7 Αναφορές

Ίδρυμα

Οι πεπτόνες που περιέχονται στον ζωμό χρησιμεύουν ως θρεπτικά συστατικά για την κατάλληλη ανάπτυξη μικροοργανισμών. Τα στελέχη της σαλμονέλας χρησιμοποιούν πεπτόνες ως πηγή αζώτου, βιταμινών και αμινοξέων.

Η λακτόζη είναι ο ζυμώσιμου υδατάνθρακα, ενώ νάτριο σεληνιώδες είναι ο αναστολέας που επιβραδύνει την ανάπτυξη των Gram-θετικών βακτηριδίων και πιο βακτήρια που υπάρχουν στην εντερική χλωρίδα, ιδίως της οικογένειας Enterobacteriaceae. φωσφορικό νάτριο είναι το ρυθμιστικό διάλυμα το οποίο σταθεροποιεί το ρΗ του μέσου.

Στην περίπτωση της παραλλαγής ζωμού σεληνίτη που περιέχει L-κυστίνη, αυτή η πρόσθετη ένωση είναι ένας αναγωγικός παράγοντας που ελαχιστοποιεί την τοξικότητα του σεληνίτη, αυξάνοντας την ανάκτηση της σαλμονέλας.

Προετοιμασία

-Σεληνίτη ζωμό

Εάν έχετε τα συστατικά του μείγματος μπορείτε να ζυγίσετε:

4 gr άνυδρου σεληνίου υδρογόνου νατρίου.

10 g ανύδρου φωσφορικού νατρίου.

5 γρ. Πεπτών.

4 gr λακτόζης.

Διαλύστε τις ενώσεις σε 1 λίτρο αποστειρωμένου απεσταγμένου νερού. Μπορεί να θερμανθεί ελαφρώς για να διαλυθεί στο σύνολό του.

Ορισμένα εργαστήρια εκθέτουν το μέσο για 10 λεπτά σε υγρό ατμό για να το αποστειρώσουν, καθώς δεν πρέπει να χρησιμοποιηθεί αυτόκλειστο. Εάν το μέσο αποστειρωθεί, μπορεί να αποθηκευτεί στο ψυγείο μέχρι να χρησιμοποιηθεί.

Μπορεί επίσης να παρασκευαστεί χωρίς αποστείρωση και απευθείας σε 10 έως 15 ml στους αποστειρωμένους δοκιμαστικούς σωλήνες.

Σε αυτή την περίπτωση, πρέπει να αφήνεται να ξεκουραστεί και να χρησιμοποιηθεί αμέσως. Δεδομένου ότι το μέσο δεν είναι αποστειρωμένο, δεν μπορεί να αποθηκευτεί σε ψυγείο για μεταγενέστερη χρήση.

-Προετοιμασία του εμπορικού μέσου

Αν το μέσο διαθέσιμα εμπορικά 23 g αφυδατωμένου μέσου ζυγίζονται και διαλύονται σε ένα λίτρο αποστειρωμένου απεσταγμένου νερού. Ζεσταίνετε εν συντομία για να τελειώσετε τη διάλυση. Μην αποστειρώνετε σε αυτόκλειστο. Σερβίρετε ασηπτικά 10 ή 15 ml σε αποστειρωμένους δοκιμαστικούς σωλήνες.

Το τελικό ρΗ του μέσου θα πρέπει να είναι 7,0 ± 0,2.

Πρέπει να σημειωθεί ότι το χρώμα του αφυδατωμένου μέσου είναι μπεζ και το παρασκεύασμα είναι διαυγές και ημιδιαφανές.

Παραλλαγή σουλίνης-κυστίνης ζωμού

Περιέχει τις ίδιες ενώσεις του ζωμού σεληνίτη, αλλά προστίθενται 10 mg κυστίνης. Η υπόλοιπη διαδικασία είναι ακριβώς η ίδια όπως περιγράφεται παραπάνω.

Χρησιμοποιεί

Αυτό το μέσο είναι ειδικό για χρήση σε επιδημιολογικές μελέτες, σε περιπτώσεις όπου η ασθένεια δεν βρίσκεται στο οξεικό στάδιο, ασυμπτωματικοί ασθενείς ή υγιείς φορείς.

Η απομόνωση του γένους Salmonella είναι συνήθως δύσκολη, καθώς συνήθως διαπιστώνεται ότι μολύνουν τα δείγματα με σπάνιο τρόπο. Η ύπαρξη σε μικρές ποσότητες αλληλοεπικαλύπτεται εύκολα από την ανάπτυξη άλλων βακτηριακών γενεών που βρίσκονται σε μεγαλύτερη ποσότητα.

Επιπλέον, η πρώτη ύλη για επεξεργασμένα τρόφιμα παράγονται συχνά εκτίθενται σε θερμότητα, διεργασίες αφυδάτωσης, η χρήση απολυμαντικών και συντηρητικών ακτινοβολία, κλπ.

Ως εκ τούτου, Salmonellae παρούσα στην πρώτη ύλη είναι αντικείμενο κατάχρησης από υποβολή του προϊόντος με τις προαναφερθείσες βιομηχανικές διεργασίες. Ομοίως, στην περίπτωση κλινικών δειγμάτων όπως τα κόπρανα, τα στελέχη μπορεί να είναι ασθενή εάν προέρχονται από ασθενείς που έχουν υποβληθεί σε θεραπεία με αντιβιοτικά..

Ως εκ τούτου, οποιοδήποτε δείγμα στο οποίο υπάρχει υποψία η παρουσία Salmonella να είναι προ-εμπλουτισμένα σε ζωμό λακτόζης, και στη συνέχεια εμπλουτίζεται σε σεληνίτη να βελτιστοποιήσουν την ανάκτηση επιλεκτική, όπως SS media ξυλόζη άγαρ άγαρ, δεοξυχολικό λυσίνη (XLD ), Hektoen άγαρ εντερική (HE) και -Φωτεινό πράσινο άγαρ, κλπ.

Σπαρμένο

Για δείγματα κοπράνων λαμβάνεται 1 g δείγματος και αναστέλλεται σε σωληνάριο με 10 έως 15 ml ζωμού σεληνίτη. Εάν το κόπρανο είναι υγρό, πάρτε 1 ml και αναστέλλετε το ζωμό. Για τα μάκτρα από το ορθό, αποφορτίστε το υλικό από το στέλεχος στο ζωμό.

Σε δείγματα στερεών τροφών πάρτε 1 gr και αναστέλλετε το ζωμό σεληνίτη.

Σε υγρά τρόφιμα αναμειγνύεται σε ίσα μέρη με το ζωμό σεληνίτη σε διπλή συγκέντρωση.

Για πρέπει να φυγοκεντρηθεί δείγματα ούρων, το υπερκείμενο απορρίφθηκε, λαμβάνοντας όλα τα ιζήματα και εναιώρησης στο σεληνιώδες.

Οι ζωμοί επωάζονται στους 37 ° C για 24 ώρες επώασης. Η βακτηριακή ανάπτυξη αποδεικνύεται από θολερότητα. Ένας επιπλέον σωλήνας ανά δείγμα μπορεί επίσης να συμπεριληφθεί για επώαση στους 42 ° C. Στη συνέχεια, σπέρνουν επιλεκτικά στερεά μέσα από το ζωμό σεληνίτη.

Έλεγχος ποιότητας

Για τον έλεγχο στειρότητας Επώαση στους 37 ° C για 24 ώρες, ένα σεληνικό της κάθε παρτίδας μη εμβολιασμένο. Αναμένεται ότι δεν υπάρχει θολότητα ή αλλαγή χρώματος του μέσου.

Προκειμένου να ελέγχεται η καλή λειτουργία του μέσου, μπορούν να χρησιμοποιηθούν γνωστά στελέχη, όπως:

Salmonella enteritidis ATCC 13076, Salmonella typhimurium ATCC 14028,  Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 και Proteus mirabilis ATCC 43071.

Τα αναμενόμενα αποτελέσματα είναι:

• Για τα τρία πρώτα βακτηριακά στελέχη η ανάπτυξη πρέπει να είναι ικανοποιητική.
• Για να Escherichia coli μερική αναστολή.
• Για τη μέτρια ανάπτυξη του Proteus.

Περιορισμοί

Ο μέσος σουλφιτονικός ζωμός είναι τοξικός για το ανθρώπινο δέρμα, επομένως πρέπει να αποφεύγεται η άμεση επαφή.

Αναφορές

1. Flores-Abuxapqui J, pUC-Franco M, Heredia-Navarrete M, Living-Rosel M, Franco-Monsreal J. Σύγκριση σεληνικό νάτριο μέσα καλλιέργειας και τετραθειονικό νάτριο, επωάζονται τόσο στους 37 ° C και 42 ° C για την απομόνωση του Salmonella σκαμνί των σκαμνιών μεταφοράς. Rev Biomed 2003; 14 (4): 215-220
2. Εργαστήρια Βρετανίας. Σελέντο Κάλντο. 2015. Διατίθεται στη διεύθυνση: britanialab.com
3. Neogen Laboratories Selenito ζωμός Διατίθεται στη διεύθυνση: foodsafety.neogen.com
4. -Pedraza Gonzalez J, Pereira -Sanandres Ν, Soto -Varela Ζ, Hernandez -Aguirre Ε, Camacho Villarreal- J. μικροβιολογικής απομόνωσης Salmonella spp. και μοριακά εργαλεία για την ανίχνευσή του. Υγεία, Barranquilla 2014; 30 (1): 73-94. Διατίθεται από: http://www.scielo.org.
5. Forbes Β, Sahm D, Weissfeld Α. (2009). Μικροβιολογική διάγνωση της Bailey & Scott. 12 ed. Editorial Panamericana S.A. Αργεντινή.